Описание

Инструкция по применению набора реагентов «Питательная среда для выделения энтеробактерий сухая (Агар Эндо)»

НАЗНАЧЕНИЕ

«Агар Эндо» предназначен для выделения энтеробактерий из исследуемого материала и их дифференциации по признаку ферментации лактозы.

Выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г.

ПРИНЦИП МЕТОДА

Выделение энтеробактерий осуществляется микробиологическим методом.

Принцип метода – визуальное обнаружение бактерий, выросших на питательной среде при посеве исследуемых образцов.

СОСТАВ

«Агар Эндо» представляет собой смесь сухих компонентов из расчета г/л:

Питательный агар сухой — 26,5

ЭКДА — 1,22

Фуксин основной — 0,23

Сахар молочный — 10,7

Динатрия фосфат — 0,48

Натрия сульфит безводный — 0,83

Натрий углекислый — 0,03

АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

Специфическая активность (показатели чувствительности, скорости роста и стабильности основных биологических свойств микроорганизмов).

Среда должна обеспечивать рост тест-штаммов Shigella sonnei «S.form», Shigella dysenteriae 1 1362, Escherichia coli 3912/41 (O55:K59), Escherichia coli 168/59 (O111:K58) на всех засеянных чашках Петри при посеве по 0,1 мл микробной взвеси каждой культуры из разведения 10^-6, разведенной стерильным 0,9 % раствором натрия хлорида в соотношении 1:1, через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С. Колонии S.dysenteriae 1 1362 должны быть бесцветными, прозрачными, круглыми, диаметром 1,0-2,0 мм, колонии S.sonnei «S.form» могут быть слегка розоватого цвета, со слабо выраженным центром, диаметром 1,5-2,5 мм. Колонии Е.coli 3912/41 (О55:К59) – красного цвета, с металлическим блеском, круглые, диаметром 2,0-3,0 мм. Колонии Е.coli 168/59 (О111:К58) — красного цвета, круглые, металлический блеск может быть менее выражен, диаметром 1,5-2,5 мм.

Дифференцирующие свойства среды.

Среда должна обеспечивать четкую дифференциацию шигелл от эшерихий на всех засеянных чашках при посеве по 0,1 мл каждой микробной смеси тест-штаммов: S.sonnei «S.form» и Е.coli 168/59 (О111:К58), S.dysenteriae 1 1362 и Е.coli 3912/41 (О55:К59) в равных объемах из разведения 10^-6через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С.

Показатель ингибиции

Среда должна полностью подавлять рост тест-штамма Staphylococcus aureus Wood-46 на всех засеянных чашках при посеве по 0,1 мл микробной взвеси из разведения 10^-1через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С.

ОБРАЗЦЫ

Объекты исследований в санитарной и клинической микробиологии.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Соблюдение «Правил устройства, техники безопасности производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981)

ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ

Термостат, обеспечивающий температуру (37±1) °С
Флаконы стеклянные, вместимостью 1 л
Цилиндр стеклянный мерный, вместимостью 1000 мл
Чашки Петри
Вода дистиллированная
Спиртовка
0,9 % раствор натрия хлорида

ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ

«Агар Эндо» в количестве 40 г тщательно размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят 3 мин до полного расплавления агара, фильтруют через ватно-марлевый фильтр и снова доводят до кипения. Среду охлаждают до температуры 45-50 °С, перемешивают и, соблюдая правила асептики, разливают в стерильные чашки Петри слоем 3-4 мм. После застывания среды чашки подсушивают при температуре (37±1) °С в течение 40-60 мин. Готовая среда в чашках Петри — прозрачная, розового цвета. Готовую среду используют в день приготовления, хранят до посева в защищенном от света месте.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

Взятие, посев инфицированного материала и учет результатов производят в соответствии с «Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями (М., 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 г №533 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-диагностических учреждений».

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИЯ

«Агар Эндо» необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 25 ºС.

Срок годности – 3 года со дня изготовления. «Агар Эндо» с истекшим сроком годности использованию не подлежит.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей инструкции по применению.

Рекламации на качество набора реагентов «Питательная среда для выделения энтеробактерий сухая агар Эндо» в течение срока годности следует направлять в адрес производителя: ФГУП «НПО «Микроген», Минздрава России, Россия 115088, г. Москва, ул.1-ая Дубровская, д.15, тел.(495)710-37-87. Адрес производства: Россия, 367010, Республика Дагестан, г. Махачкала, ул.А.Султана , 13 б тел. 8722 55 82 32