Описание
Инструкция по применению набора реагентов пептон основной сухой
1.НАЗНАЧЕНИЕ
1.1.Набор реагентов предназначен для накопления холерного вибриона.
1.2.Выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г.
2.ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1.Принцип метода
Принцип метода – визуальное обнаружение бактерий, выросших на питательной среде при посеве исследуемых образцов.
2.2.Состав набора
Набор реагентов представляет собой смесь сухих компонентов.
Состав (г/л):
-Пептон ферментативный для бактериологических
целей сухой 149,4 г
-Натрия хлорид 66,2 г
-Калий азотнокислый 1,7 г
-Сода кальцинированная 18,7 г
-Натрий сернокислый пиро (метабисульфит) 4,94
3.АНАЛИТИЧЕСКАЯ И ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Набор реагентов должен обеспечивать рост тест-штаммов Vibrio cholerae 01 группы Р-1 (145), Vibrio cholerae elton 01 группы М-878 (890), Vibro cholerae non 01 P-9741 при посеве по 0,1 мл взвеси из разведения 10-7 (10 КОЕ) через 6 ч инкубации при температуре (37±1) ºС.
4.МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Соблюдение «Правил устройства, техники безопасности производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отдеениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981 г.).
5.ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ
-автоклав;
-бутылки;
-чашки Петри;
-термостат, обеспечивающий температуру (37±1) ºС;
-пипетка вместимостью 1 мл 2-го класса точности;
-пробирки;
-петля бактериологическая.
6.АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ПРОБЫ
Объекты исследований в санитарной и клинической микробиологии.
7.ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
7.1.Приготовление рабочего раствора реагента (пептонной воды)
240,94 г набора реагентов размешивают в 1 л дистиллированной воды, доводят до кипения, кипятят в течение 2 мин, фильтруют через ватный фильтр, затем разводят в 10 раз дистиллированной водой, доводя тем самым основной раствор пептона до концентрации 1 % в пересчете на пептон, разливают по 100 мл во флаконы, закрывают ватно-марлевыми пробками и стерилизуют автоклавированием в течение 30 мин при температуре (121±2) ºС.
Готовую среду можно хранить в течение 10-14 сут приусловии хранения ее при температуре от 2 до 8 ºС.
7.2.Посев исследуемого материала
Посев исследуемого материала проводить согласно Методических указаний Роспотребнадзора 3.3.2.2124-06. «Контроль диагностических питательных сред по биологическим показателям для возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы,туляремии, бруцеллеза, легионеллеза» М., 2007 г.
По 0,1 мл микробной взвеси каждого тест-штамма Vibrio cholerae 01 группы Р-1 (145), Vibrio cholerae eltor 01 группы М-878 (890), Vibrio cholerae non 01 P-9741, содержашей по 10 КОЕ (разведение 10-7) засеивают в 3 флакона со 100 мл пептонной воды. Через 6 ч инкубации при температуре (37 ±1) ºC из каждого флакона бактериологической петлей диаметром 5 мм высеивают культеру на 3 чашки Петри с заранее отконтролированным щелочным агаром. Выращивание прозводят 12-18 ч при температуре (37±1) ºС.
Основной пептон считают пригодным, если на всех засеянных чашках Петри со щелочным агаром вырастает не менее 1 колонии каждого тест-штамма.
В качестве контроля используют заранее отконтролированную пептонную воду.
Работу со штаммами V. cholerae 01 группы Р-1(145), V. cholerae eltor 01 группы М-878 (890) проводят в соответствии с СП. 1.3.1285-03 «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности», со штаммом V. choleroe non 01 P-9741 в соответствии с СП 1.2.731-99 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности и гельминтами».
8.РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Регистрацию результатов анализа проводят визуально, по наличию роста колоний.
9.УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Учет результатов производят согласно Методическим указаниям Роспотребнадзора 3.3.2.2124-06. «Контроль диагностических питательных сред по биологическим показателям для возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза, легионеллеза» М., 2007г.
10.УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
Набор реагентов Пептон основной сухой хранят в герметично закрытой упаковке, в сухом месте при температуре от 2 до 25 ºС .
Набор реагентов транспортируют при температуре от 2 до 25 ºС всеми видами крытого транспорта.
Срок годности — 3 года в банках, 2 — года в пакетах со дня изготовления. Набор реагентов с истекшим сроком годности использованию не подлежит.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей Инструкции по применению.
Рекламации на качество набора реагентов Пептон основной сухой в течение срока годности следует направлять в адрес производителя: ФГУП «НПО «Микроген» Минздрава России, Россия, 115114, г. Москва, ул.1-Дубровская, д.15 тел. (495) 710-37-87.
Адрес производства: Россия, 367010, Республика Дагестан г.Махачкала, ул.А.Султана , 13 б тел. 8722 55 82 32