Описание

Инструкция по применению набора реагентов «Питательная среда с эозин-метиленовым синим сухая (среда Левина)»

НАЗНАЧЕНИЕ

Набор реагентов «Питательная среда с эозин-метиленовым синим сухая (среда Левина)» предназначен для выделения энтеробактерий из исследуемого материала и их дифференциации по признаку ферментации лактозы, выделение коагулазоположительных стафилококков при обследовании декретированных групп.

ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА

2.1. Принцип метода.

Принцип метода – визуальное обнаружение энтеробактерий, выросших на питательной среде Левина при посеве исследуемых образцов.

2.2. Состав набора.

Набор реагентов «Питательная среда с эозин-метиленовым синим сухая (среда Левина)» представляет собой смесь сухих компонентов из расчета г/л:

Питательный агар сухой -36,28

Сахар молочный -12,95

Эозин-Н -0,63

Метиловый голубой -0,076

Сода кальцинированная -0,064

Набор реагентов «Питательная среда с эозин-метиленовым синим сухая (среда Левина)» выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г,

АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА

3.1. Чувствительность среды, скорость роста и стабильность основных биологических свойств микроорганизмов. Набор реагентов «Питательная среда с эозин-метиленовым синим сухая (среда Левина)» должен обеспечивать на всех засеянных чашках рост тест-штаммов Shigella flexneri la 8516 и Escherichia coli 168/59 (O111:K58) при посеве по 0,1 мл микробной взвеси из разведений 10^-7 и 10^-6 через 18-20 ч инкубации и тест-штамма Staphylococcus aureus 209-P при посеве по 0,1 мл микробной взвеси из разведения 10^-5 не позднее 72 ч инкубации при температуре (37±1) °С.

Колонии S.flexneri 1а 8516 должны быть бесцветными прозрачными круглыми диаметром 1,0-2,0 мм. Колонии Е.coli 168/59 (О111:К58) – темно-фиолетовые с металлическим блеском (возможна слабая выраженность металлического блеска) диаметром 1,5-2,5 мм. Колонии S.aureus 209-Р – круглые, бесцветные или розоватого цвета диаметром до 1 мм.

3.2. Дифференцирующие свойства среды. Питательная среда Левина должна обеспечивать четкую дифференциацию по цвету колоний тест-штамма S. flexneri la 8516 от E. coli 168/59 (O111:K58) при посеве по 0,1 мл микробной смеси указанных тест-штаммов из разведения 10^-6 через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Соблюдение «Правил устройства, техники безопасности производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981 г.).

ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ

Термостат, обеспечивающий температуру (37±1) °С;
Автоклав;
Пробирки стеклянные (ГОСТ 25336-82);
Чашки Петри (ГОСТ 23932-90);
Вода дистиллированная (ГОСТ 6709-72);
Спиртовка (ГОСТ 25336-82);
0,9 % раствор натрия хлорида (ГОСТ 4233-77);
Пипетки (ГОСТ 29227-91);
Воронка (ГОСТ 25336-82);
Вата медицинская гигроскопическая (ГОСТ 5556-81)

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Объекты исследований в санитарной и клинической микробиологии.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

7.1. Подготовка питательной среды для использования.

50 г среды Левина размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят 3 мин до полного расплавления агара, фильтруют через ватный фильтр разливают в стерильные бутылки и стерилизуют автоклавированием в течение 20 мин при температуре 112 °С. Среду после стерилизации охлаждают до температуры 45-50 ^оС, разливают по 20 мл в стерильные чашки Петри слоем 3-4 мм.

После застывания среды, соблюдая правила асептики, чашки подсушивают в течение 40-60 мин при температуре (37±1) °С. Готовая среда может быть использована в течение 7 сут при условии хранения при температуре 2-8 °С.

7.2. Посев исследуемого материала проводить согласно «Методическим указаниям по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями» (М.,1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследований, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений».

РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ

Регистрацию результатов анализа проводят визуально, по наличию роста колоний.

УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Учет результатов производят согласно «Методическим указаниям по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями» (М., 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследований, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений».

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА.

Набор реагентов «Питательная среда с эозин-метиленовым синим сухая (среда Левина)» необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 25 ºС.

Транспортирование должно проводиться при температуре от 2 до 25 ºС всеми видами крытого транспорта.

Срок годности – 3 года со дня изготовления. Набор реагентов с истекшим сроком годности использованию не подлежит.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей Инструкции по применению.

Рекламации на препарата в течение срока годности направлять в адрес производителя: ФГУП «НПО «Микроген» Минздрава России: Россия, 115088, г. Москва, ул. 1-я Дубровская, д.15, тел.(495) 710-37-87. Адрес производства: Россия, 367010, Республика Дагестан, г. Махачкала, ул.А.Султана , 13 б тел. 8722 55 82 32