Железо-глюкозо-лактозный агар

Описание

Инструкция по применению набора реагентов «Питательная среда   для идентификации энтеробактерий сухая (Железо-глюкозо-лактозный агар, двухслойный)»

 

1.НАЗНАЧЕНИЕ

Набор реагентов «Питательная среда для идентификации энтеробактерий сухая (Железо-глюкозо-лактозный агар, двухслойный)» предназначен для идентификации энтеробактерий по их способности ферментировать глюкозу и лактозу, образовывать сероводород и расщеплять мочевину (при добавлении реактива к среде ex temporo).

2.ХАРАКТЕРИСТИКА

2.1.Принцип метода.

Принцип метода – визуальное обнаружение энтеробактерий, выросших на питательной среде  при посеве исследуемых образцов.

2.2.Состав набора.

Набор реагентов    представляет  собой  комплект    из двух  компонентов:  № 1 для нижнего   и  № 2  для верхнего слоев среды, получаемый   смешиванием сухих ингредиентов из расчета г/л:

     Компонент №1 «Нижний слой»                                                  Компонент  № 2 «Верхний слой»

Экстракт кормовых дрожжей                                 0,15                                Экстракт кормовых дрожжей          0,35

Пептон сухой ферментативный                                                                    Д(+)-лактоза                                      9,52

для бактериологических целей                              3,0                                  Динатрия фосфат обезвоженный     3,22

Д-глюкоза                                                                1,2                                   Соль Мора                                         0,56

Натрий серноватистокислый безводный               2,04                               Феноловый красный

Динатрия фосфат обезвоженный                           0,60                                водорастворимый                             0,056

Феноловый красный водорастворимый                 0,02                              Натрия додецилсульфат                  0,042

Бриллиантовый зеленый                                         0,001                             Агар микробиологический          6,30±0,1

Агар микробиологический                                     1,5±0,1          

 

Набор реагентов «Питательная среда   для идентификации энтеробактерий сухая (Железо-глюкозо-лактозный агар, двухслойный)»  выпускается в виде комплекта из двух банок с каждым компонентом среды: компонент № 1 «Нижний слой»  — по 160 г, компонент № 2 «Верхний слой»  по 250 г  в   полиэтиленовых банках вместимостью 350 мл соответственно.

  1. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРСТИКИ НАБОРА.

 3.1. Специфическая активность (чувствительность среды, скорость роста и дифференцирующие свойства).

При посеве в 3 пробирки со средой по одной бактериологической петле, диаметром  2 мм питательная среда  должна  обеспечивать рост каждого из тест-штаммов: Shigella flexneri 1а 8516, Escherichia coli  3912/41 (О55:К59),  Proteus vulgaris НХ 19 222, Citrobacter freundii 58/57,  Salmonella typhi Н-901 ГДР/ГИСК через 20-24 ч инкубации при температуре (37±1) °С   c соответствующим проявлением тестов:

         Штаммы Ферментация глюкозы Ферментация лактозы Образование сероводорода Расщепление мочевины
Shigella flexneri 1а 8516 +
Escherichia coli 3912/41 (О55:К59) +
Salmonella typhi Н-901 ГДР/ГИСК + +
Citrobacter freundii 58/57 + +
Proteus vulgaris

НХ 19 222

Учет затруднителен (реакция маскируется) Учет затруднителен (реакция маскируется) + +

Примечание.

1) Ферментация глюкозы:

+  (положительная реакция)– пожелтение столбика среды (для штамма Shigella flexneri 1а 8516 возможно пожелтение среды «по уколу»);

Г  (газообразование) – разрывы (пузырьки) внутри столбика среды

2) Ферментация лактозы:

+ (положительная реакция) – пожелтение скошенной части среды;

— (отрицательная реакция) – отсутствие пожелтения скошенной части среды.

3) Образование сероводорода:

+ (положительная реакция) – почернение верхней части столбика среды;

— (отрицательная реакция) – отсутствие почернения среды

4) Расщепление мочевины:

+ (положительная реакция) – окрашивание в малиновый цвет всей или только  скошенной части среды;

— (отрицательная реакция) – отсутствие малинового окрашивания среды.

4.МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Соблюдение «Правил устройства, техники безопасности производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения» (Москва, 1981 г.).

5.ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ

  • Термостат, обеспечивающий температуру (37±1) °С
  • Флаконы стеклянные
  • Пробирки стерильные
  • Пипетки стеклянные стерильные
  • Спиртовка
  • Вода дистиллированная
  • 50% раствор мочевины

6.АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ПРОБЫ

Объекты исследований в санитарной и клинической микробиологии.

7.ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

7.1.Приготовление  питательной среды.

Компонент №1 «Нижний слой».  Компонент в количестве, указанном на этикетке, размешивают в 300 мл дистиллированной  воды,  кипятят 1-2 мин, охлаждают  до температуры 48-52 °С, добавляют 2,4 мл 50 % раствора мочевины*, разливают по 2 мл стерильной пипеткой в стерильные пробирки   и оставляют для застывания «столбиком».

Компонент №2 «Верхний слой». Компонент в количестве, указанном на этикетке, размешивают в 700 мл дистиллированной воды, кипятят 1-2 мин, охлаждают до температуры 48-52 °С, разливают стерильной пипеткой по 4,5 мл в стерильные пробирки поверх застывшего «нижнего слоя» и скашивают, оставив столбик высотой около 20 мм.

Готовая среда красного цвета. Готовая среда может быть использована в течение месяца при условии хранения при температуре 2-8 °С.

*Примечание

Приготовление 50 %  раствора мочевины: 50 г мочевины

ТУ  (6-09-2117) растворяют в 50 г  дистиллированной

воды, выдерживают 2-3 сут при температуре 18-22°С для

самостерилизации. Готовый раствор можно хранить при

температуре 18-22 °С в течение месяца.

Для проверки стерильности обоих компонентов среды по 5 пробирок с отдельно разлитыми «нижним» и «верхним» слоями среды  выдерживают  при температуре (37±1) °С в течение 40-48 ч. (Наличия роста микроорганизмов и изменения цвета среды не должно быть).

7.2. Посев  исследуемого  материала проводить  согласно  «Методическим  указаниям по микробиологической  диагностике  заболеваний,  вызываемых  энтеробактериями» (М,, 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследований, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений»

8.РЕГИСТРАЦИЯ   РЕЗУЛЬТАТОВ

Регистрацию результатов анализа проводят визуально, по наличию роста колоний.

  1. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Учет  результатов  производят   согласно «Методическим указаниям  по микробиологической  диагностике  заболеваний,  вызываемых  энтеробактериями» (М,, 1984 г) и приказом Минздрава СССР от 22.04.85 № 535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследований, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений»

  1. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА

Набор реагентов «Питательная среда для идентификации энтеробактерий сухая (Железо-глюкозо-лактозный агар двухслойный)» необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом, защищенном от света месте при температуре от  2 до 25 ºС.

Транспортирование должно проводиться при температуре от 2 до 25 ºС  всеми видами крытого транспорта.

Срок годности –  2 года со дня изготовления. Набор реагентов с истекшим сроком годности использованию не подлежит.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей Инструкции по применению.

Рекламации на качество набора реагентов в течение срока годности следует направлять в адрес производителя:   ФГУП «НПО «Микроген»,115088, г. Москва, ул. 1-я Дубровская, 15, тел.(495)  710-37-87.  Адрес производства:  367010, г. Махачкала, ул.А.Султана , 13  б   тел. 8722 55 82 32.

 

Железо-глюкозо-лактозный агар



Обратите Внимание

Это покупают чаще всего